【摘 要】
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为了克隆杀菌/通透性增加蛋白(BPI)N端cDNA,构建重组体pMD18-T-BPI,并进行序列鉴定,应用RT-PCR技术,参照GenBank报道的预测序列,从鸡多形核白细胞(PMN)mRNA中扩增出杀菌/通透
【机 构】
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安徽农业大学,动物科技学院,安徽,合肥,230036
【出 处】
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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会
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为了克隆杀菌/通透性增加蛋白(BPI)N端cDNA,构建重组体pMD18-T-BPI,并进行序列鉴定,应用RT-PCR技术,参照GenBank报道的预测序列,从鸡多形核白细胞(PMN)mRNA中扩增出杀菌/通透性增加蛋白(BPI)氨基端95个氨基酸的基因片段,并与pMD18-T连接,构建BPI氨基端的基因重组体,进行酶切鉴定和序列测定;从猪PMN的总mRNA中扩增出BPI氨基端48个氨基酸的基因片段,进行测序鉴定.获得鸡BPIN端长度为285bp的基因片段.序列分析证实该片段中有3个点突变,但均不在活性中心;获得猪BPIN端长度为146bp的基因片段.成功克隆出BPIN端基因,经序列测定,确认为BPI基因,为进一步表达该基因奠定了基础.
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