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以4份番石榴属植物嫩叶为材料,利用L16(43)正交试验设计方法,对2×Taq Mix、模板DNA、引物浓度3个因素进行4个水平筛选.结果 表明,反应各因素对SSR-PCR体系的影响程度为2×Taq Mix用量＞DNA模板量＞引物浓度,适合番石榴属植物SSR-PCR反应的最佳体系为20 μL.反应体系包含了DNA模板40 ng、引物各0.3 μmol/L、2×Taq Mix 10 μL,ddH2O 4.8μL;运用该优化体系从23对SSR引物中筛选出21对扩增条带清晰、多态性良好的SSR引物,多态引物占比91.30％;利用9份番石榴种质验证了SSR-PCR体系具有较高的稳定性和重复性.