【摘 要】
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为开发可溶性B淋巴细胞刺激因子(sBLyS)检测试剂,研究克隆sBLyS编码基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)表达系统中表达sBLyS重组蛋白。sBLyS重组蛋白经镍柱亲和层析纯化后,免疫BALB/
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81702732)。
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为开发可溶性B淋巴细胞刺激因子(sBLyS)检测试剂,研究克隆sBLyS编码基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)表达系统中表达sBLyS重组蛋白。sBLyS重组蛋白经镍柱亲和层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术构建可分泌抗sBLyS单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用正辛酸-硫酸铵沉淀方法纯化单克隆抗体,并利用Western Blot和ELISA方法检测抗体活性和效价。以未标记抗体作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体作为检测抗体,进行双抗体夹心ELISA试验,筛选最佳组合。结果显示:成
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