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目的
建立超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测血清α-羟基丁酸(α-HB)的方法。
方法方法学建立及评价。使用电喷雾电离源负离子及多反应监测模式检测α-HB,对方法的线性范围、定量下限、精密度、回收率、干扰等进行评估,并检测上海市东方医院收集的表观健康人群血清标本130份(其中来自男62例,女68例)初步建立该方法的参考区间,用Dixon法判断离群值,采用K-S检验进行数据正态性分析,标准曲线采用一元线性回归分析。
结果所建立的方法分析时间为4 min,在0.5~40.0 mg/L浓度范围内线性良好(r=0.999 4);定量下限为0.5 mg/L;批内和批间精密度分别小于4.1%和6.3%;回收率在95.8%~103.8%;溶血样本(血红蛋白浓度约为5 g/L)、脂血样本(三酰甘油浓度约为12 mmol/L)、黄疸样本(总胆红素浓度约为150 μmol/L)对检测无明显干扰,表观健康人群参考区间为1.46~6.48 mg/L。
结论本研究建立了UHPLC-MS/MS检测血清α-HB的方法,方法性能满足临床检测,且简便快速,可用于临床样本检测。