【摘 要】
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目的 改良Sprague Dawley(SD)新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法.方法 取新生1～2d的SD,分2d完成视网膜Müller细胞的提取,第1天将眼球浸泡于含体积分数1％双抗的无血清高糖达尔
【机 构】
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中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院眼科,重庆,400037
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目的 改良Sprague Dawley(SD)新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法.方法 取新生1～2d的SD,分2d完成视网膜Müller细胞的提取,第1天将眼球浸泡于含体积分数1％双抗的无血清高糖达尔伯克改良伊戈尔培养基(DMEM)中,置于37℃、含体积分数5％ CO2的培养箱内过夜;第2天,去培养基,以2.5 g·L-1胰蛋白酶消化眼球1h,分离视网膜组织,加入含体积分数1％双抗和体积分数10％胎牛血清的高糖DMEM培养基,制备细胞悬液接种培养;24 h后换液,6～8d后传代,传至第4代,细胞免疫荧光染色法鉴定Müller细胞纯度.结果 Müller细胞贴壁生长良好,细胞体宽大,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形,无神经元共生长,Müller细胞纯度＞95％.结论 改良的SD新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法操作简单,细胞纯度高.
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