启膈散及其拆方对食管癌细胞Eca109 PLC-γ1介导的细胞信号转导的影响

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目的:观察启膈散及其活血和化痰两个拆方对人食管癌细胞株Eca109细胞磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)介导的细胞信号转导的影响,以研究启膈散治疗食管癌的作用机制.方法:用启膈散(W)及其活血(P)和化痰(R)两个拆方的水提物处理体外培养的人食管癌细胞株Eca109细胞,测定细胞PLC-γ1、表皮生长因子受体(EGFR)和PKCα蛋白表达水平、蛋白酪氨酸磷酸化(PY99)水平和豆蔻酰化富丙氨酸C激酶底物(MARCKS)(Ser152/156)磷酸化水平、细胞内游离钙离子[Ca2+]i浓度及蛋白激酶C(PKC)活性.结果:1mg/L的启膈散及其拆方明显抑制Eca109细胞PLCγ1蛋白表达(0.31%,0.42%,0.20%),随着药物浓度增加其抑制作用分别增强,启膈散及其拆方对体外培养的食管癌细胞PLC-γ1、EGFR和PKCα表达、PLC-γ1和EGFR酪氨酸磷酸化、MARCKS磷酸化、[Ca2+]i浓度(169.65±30.54 nmol/L,145.84±24.12 nmol/L.214.94±37.14 nmol/L vs 231.86±51.10 nmol/L,P>0.05,P<0.05,P>0.05)及PKC活性均有不同程度的抑制作用,以P组作用最强.结论:启膈散及其拆方通过不同程度的抑制食管癌细胞PLC-γ1介导的信号转导而抑制肿瘤细胞的生长.
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