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目的：构建乙脑病毒（JEV）E蛋白重组载体并在原核细胞BL21（DE3）中表达.方法：采用RT-PCR扩增片段,定向克隆入pET28a（＋）中;重组载体pET28a-6His-E转化BL21（DE3）,通过酶切、SDS-PAGE和Western Blotting检测其载体构建和蛋白表达;表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化.结果：构建得到原核融合重组载体pET28a-6His-E;诱导后表达得到6His-E融合蛋白,纯化得到表达产物并进行了初步的鉴定.结论：表达并纯化得到JEVE蛋白原核表达产物.