细菌超声分散计数仪在分枝杆菌药物敏感性试验中的应用价值

来源 :中国防痨杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenjing1566
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目的 评估细菌超声分散计数仪(简称“分散仪”)在分枝杆菌药物敏感性试验(简称“药敏试验”)中的应用价值.方法 使用分散仪和磨菌瓶两种方法对结核分枝杆菌(MTB)标准株H37Rv和130株临床分离株进行分散处理,通过肉眼观察和抗酸染色两种方法对比这两种处理方式的分散效果;同时通过平板菌落计数和药敏试验来评估分散仪处理对分枝杆菌的活性及药敏结果的影响.结果 (1)分散效果:130株分枝杆菌临床分离株中,111株菌落形态为粗糙型,包括MTB 98株,龟脓肿分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌等共13株,经分散仪和磨菌瓶两种方法处理后肉眼及显微镜观察,菌落呈现均匀分散的菌株分别占94.59%(105/111)和60.36%(67/111),差异有统计学意义(x2=37.28,P<0.05).(2)菌株活性:上述两种方法处理后的菌悬液经7H10平板和中性罗氏培养基培养,分别于(12.10±1.85)d和(11.50±2.05)d长出中等大小菌落,差异无统计学意义(t=1.30,P>0.05).统计上述两法处理后接种在7H10平板上的菌落数,分别为(215.00±0.95)×104 CFU/ml和(207.00±1.10)×104 CFU/ml,差异无统计学意义(t=0.93,P>0.05);罗氏培养基菌落数分别为(178.00±1.31)×104 CFU/ml和(185.00±1.75)×104 CFU/ml,差异无统计学意义t=1.01,P>O.05).(3)药敏试验:分散仪处理与磨菌瓶处理菌悬液对异烟肼、链霉素、利福平、乙胺丁醇等一线抗结核药物的药敏试验结果符合率分别为100.00%(130/130)、90.00%(117/130)、96.15%(125/130)、98.46%(128/130),Kappa值分别为1.00、0.73、0.88、0.90;对阿米卡星、左氧氟沙星、莫西沙星、力克菲蒺、利福布汀、丙硫异烟胺、利奈唑胺等二线抗结核药物的药敏试验结果符合率分别为98.46%(128/130)、98.46%(128/130)、98.46%(128/130)、98.46%(128/130)、98.46%(128/130)、98.46%(128/130)、99.23%(129/130),Kappa值分别为0.74、0.85、0.79、0.85、0.89、0.91、1.00.两种处理方法处理后的菌悬液应用MGIT 960液体比例法进行药敏试验的报告阳性时间分别为(8.90±0.97)d和(9.30±1.23)d,差异无统计学意义(t=1.02,P>O.05).结论 在分枝杆菌药敏试验的菌悬液制备过程中,对比传统磨菌瓶处理方法,分散仪处理能更快、更好地实现菌株分散,并且达到菌落分散和浊度检测一体化,同时不影响菌株的活性和药敏试验结果.
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