心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的绿色荧光蛋白表达载体的构建及鉴定

来源 :郧阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:worbestczhy
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目的:构建并鉴定心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的绿色荧光蛋白表达载体(MHC—EGFP),该基因只在心肌中特异性表达。方法:设计5’和3’分别具有SalI/HindⅢ酶切位点的EGFP引物,聚合酶链反应法(PCR)从pLEGFP质粒中扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的cDNA,插入pGEM—TEasy载体表达盒,构建pGEM—EGFP,Sa1I/HindⅢ双酶切后回收729kb片断,插入经相同酶切的含5.5kb心肌特异性α肌球蛋白重链启动子的pNC26质粒,构建pMHC—EGFP。连接产物转化感受态DH5
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