【摘 要】
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目的 探讨外源性C2-神经酰胺对线粒体膜间隙蛋白释放的影响.方法 12.5、25和50μmol/L C2-神经酰胺作用人结肠癌HT-29细胞24 h,采用Mitochondrial/Cytosol Fractionation试剂
【机 构】
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哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室
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目的 探讨外源性C2-神经酰胺对线粒体膜间隙蛋白释放的影响.方法 12.5、25和50μmol/L C2-神经酰胺作用人结肠癌HT-29细胞24 h,采用Mitochondrial/Cytosol Fractionation试剂盒分离细胞线粒体和细胞液,应用Western Blotting方法检测线粒体和细胞液中Cyt c、Smac和HtrA2蛋白表达水平.结果 C2-神经酰胺作用细胞后,Cyt c、Smae和HtrA2总蛋白的表达水平未见明显改变,但随着C2-神经酰胺浓度增加,Cyt c、Smac和HtrA2从线粒体释放入细胞液中的水平逐渐增加,具有剂量-效应关系.Caspases抑制剂存在下,50 μrnol/L C2-神经酰胺仍能使Cyt c和HtrA2从线粒体释放入胞液中,但Smac却不能释放.结论 C2-神经酰胺能通过Caspases依赖和非依赖的方式促进线粒体膜间隙蛋白的释放入细胞液,诱导细胞凋亡作用.
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