【摘 要】
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目的 探讨抑制剂ICG001联合转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的治疗作用及其机制.方法 将C57BL/6J小鼠随机分为对照
【机 构】
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山西医科大学,山西太原030001;山西医科大学第二医院普外科,山西太原030001;山西医科大学,山西太原030001;山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西太原030001;山西医科大学,山
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目的 探讨抑制剂ICG001联合转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的治疗作用及其机制.方法 将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、ICG001组及ICG001+ TGF-β组(IT组).模型组、ICG001组及IT组腹腔注射20％ CCl4(0.1 mL/只),对照组腹腔注射生理盐水(0.2 mL/只),各组每周注射2次,共6周;建模第5周,对照组及模型组每日腹腔注射生理盐水(0.2 mL/只),ICG001组及IT组每日腹腔注射ICG001(0.1 mL/只),同时IT组每2日腹腔再注射TGF-β(0.1 mL/只),各组给药2周.第6周末小鼠称重,眼眶采血,收集肝脏组织.ELISA法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及夭冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;肝脏组织切片进行HE及网银染色,显微镜观察病理情况;Q-PCR法检测肝脏组织中炎性因子(IL-6、IL-10和TNFα)及纤维化指标(α-SMA、Col-Ⅰ及FOXO1)mRNA表达水平;Western blot法检测α-SMA、CogⅠ及FOXO1蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组AST及ALT含量均显著升高(P均＜0.01),ICG001组较模型组及IT组较ICG001组AST及ALT含量均降低(P均＜0.01).组织学检查提示,ICG001组及IT组均可见病理缓解,且IT组的改善程度较ICG001组明显.Q-PCR检测显示,与模型组比较,ICG001组IL-6、TNFα、α-SMA及Col-Ⅰ mRNA表达水平均显著降低(P均＜0.01),IL-10 mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),FOXO1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);与ICG001组比较,IT组IL-6、TNFα、α-SMA及Col-Ⅰ mRNA表达水平均显著降低(P均＜0.01),IL-10及FOXO1 mRNA表达水平均显著升高(P均＜0.05).Western blot分析显示,与模型组比较,ICG001组α-SMA及Col-Ⅰ蛋白表达水平均显著降低(P均＜0.01),FOXO1蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);与ICG001组比较,IT组α-SMA及Col-Ⅰ蛋白表达水平均显著降低(P均＜0.05),FOXO1蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).结论 与单用ICG001相比,ICG001联合TGF-β对CCl4致小鼠肝纤维化有更好的改善作用,可能与ICG001作用于TGF-β通路引起FOXO1变化相关.
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