【摘 要】
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目的 持续动态观察胶质瘤干细胞肿瘤生成和参与血管形成过程,研究不同生长阶段皮下移植瘤中干细胞分布与血管的关系.方法 干细胞培养基和免疫磁珠分选法获得C6细胞来源的CD13
【机 构】
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天津医科大学总医院神经外科天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室
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目的 持续动态观察胶质瘤干细胞肿瘤生成和参与血管形成过程,研究不同生长阶段皮下移植瘤中干细胞分布与血管的关系.方法 干细胞培养基和免疫磁珠分选法获得C6细胞来源的CD133+细胞.建立CD133+细胞SD大鼠耳朵模型观察胶质瘤干细胞生成肿瘤及促进肿瘤血管形成情况.免疫组化染色研究不同生长阶段移植瘤中干细胞的分布与血管的关系及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与这种分布的相关性.Western blot法检测各生长阶段肿瘤中CD133蛋白的表达情况.结果 成功分离和鉴定了C6细胞来源的CD133+细胞,并建立了SD大鼠耳朵模型可以实时动态的观察干细胞参与血管形成和肿瘤生成情况.SD大鼠皮下C6胶质瘤模型显示:在肿瘤形成的初期,CD133+细胞在肿瘤内散在分布,随着肿瘤的生长,CD133+细胞开始趋向于微血管,肿瘤生长的后期CD133+细胞在血管周成簇分布；同时随着肿瘤的生长,CD133蛋白的表达也随之增强,Western blot 检测接种后6、9、12、15、20d肿瘤中CD133表达量的吸光度值分别为0.208±0.004、0.282±0.003、0.360±0.004、0.564±0.135、0.756±0.007,各区域间的差异有统计学意义(F=2601.681,P＜0.01).免疫组化染色显示接种6、9、12、15 d皮下移植瘤中CD133的表达分值为0.8±0.4、2.4±0.5、4.0±0.7、6.0±0.7,HIF-1α的分别为0.8±0.4、2.8±0.8、5.0±0.7、6.8±0.4；两者的表达量呈正相关(r =0.921,P＜0.01).结论 胶质瘤干细胞比非干细胞更易形成肿瘤及参与肿瘤血管的形成,HIF-1α及其下游基因产物可能介导了胶质瘤干细胞围绕血管周分布.
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