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家蝇抗菌肽defensin基因的克隆、原核表达纯化及抑菌、抑肿瘤活性鉴定

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangruiqiangkang

【摘 要】

：

为研究家蝇防御素融合蛋白对肿瘤细胞K562有抑制作用，在GenBank中检索家蝇defensin基因，设计特异引物，在家蝇幼虫组织中提取RNA，并通过PCR扩增defensin基因成熟肽部分（Maturedefen

【作 者】

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焦莉萍 杨敏 侯养全 赵瑞君 原发家 杜斌 王文建 

【机 构】

：

山西医科大学基础医学部,太原生产力促进中心

【出 处】

：

寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

：

2012年4期

【关键词】

：

DEFENSIN 抗菌肽 基因克隆 原核表达 亲和层析 肿瘤细胞 Defensin   Antibacterial peptide   Gene clone  

【基金项目】

：

山西省高校科技研究开发项目（200613011）,山西省科技攻关项目（2006031087-04）,太原市科学技术发展计划项目（081049）

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为研究家蝇防御素融合蛋白对肿瘤细胞K562有抑制作用，在GenBank中检索家蝇defensin基因，设计特异引物，在家蝇幼虫组织中提取RNA，并通过PCR扩增defensin基因成熟肽部分（Maturedefensin，MD），将该基因与原核质粒表达载体pGEX．6P-1进行重组，构建家蝇抗菌肽重组蛋白pGEX-6P-1／MD。通过双酶切鉴定证明目的片段已稳定融合到载体pGEX-6P-1中并将其转化至BL21（DE3）感受态细胞中，经25℃IPTG诱导在大肠杆菌E．coliDH5u中表达。用GST—Se

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