抗菌肽DCD-1L的随机突变及在毕赤酵母中的表达

来源 :食品与药品 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lau_lfm

【摘要】

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目的用毕赤酵母构建抗菌肽DCD-1L的随机多肽库，并使随机多肽在培养基中表达。方法用定向进化的方法在基因内部造成随机突变，然后将其构建到含有强启动子GAP和α-factor信号肽序

【作者】

：

顾春华廖世奇

【机构】

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甘肃省产品质量监督检验中心,甘肃省医学科学院

【出处】

：

食品与药品

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

抗菌肽 DCD-1L 定向进化毕赤酵母 antibacterial peptide DCD-1L directed evolution Pichia p

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目的用毕赤酵母构建抗菌肽DCD-1L的随机多肽库，并使随机多肽在培养基中表达。方法用定向进化的方法在基因内部造成随机突变，然后将其构建到含有强启动子GAP和α-factor信号肽序列的巴斯德毕赤酵母载体pGAPZαC中，线性化后转化到巴斯德毕赤酵母蛋白酶缺陷株SMD1168中，形成突变库。利用抗生素Zeocin筛选出阳性克隆，并用SDS-PAGE鉴定表达蛋白质。结果肽库库容达到7．8×10^3个cfu，在上清中鉴定出了表达蛋白。结论成功构建了抗菌肽DCD-1L的随机多肽库，并实现了在培养基上清中

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