【摘 要】
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目的:探讨干扰素诱导基因IFIT3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学功能和化疗耐药性的影响.方法:本研究通过qRT-PCR或Western blot检测了30例膀胱移行细胞癌患者的肿瘤组织和配对正常癌旁组织标本以及人膀胱癌细胞系T24及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中IFIT3的表达水平.通过浓度递增法构建顺铂(DDP)耐药T24细胞(T24/DDP),然后对细胞转染靶向IFIT3的siRNA(si-IFIT3)及阴性对照(si-NC).将细胞分为4组,分别为T24-si-NC组、T24-si-I
【机 构】
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中国人民解放军空军军医大学第一附属医院泌尿外科 陕西西安710032
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目的:探讨干扰素诱导基因IFIT3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学功能和化疗耐药性的影响.方法:本研究通过qRT-PCR或Western blot检测了30例膀胱移行细胞癌患者的肿瘤组织和配对正常癌旁组织标本以及人膀胱癌细胞系T24及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中IFIT3的表达水平.通过浓度递增法构建顺铂(DDP)耐药T24细胞(T24/DDP),然后对细胞转染靶向IFIT3的siRNA(si-IFIT3)及阴性对照(si-NC).将细胞分为4组,分别为T24-si-NC组、T24-si-IFIT3组、T24/DDP-si-NC组、T24/DDP-si-IFIT3组,通过MTT法检测细胞增殖,使用Arnexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,使用Transwell法检测细胞侵袭能力.通过qRT-PCR或Western blot检测HSP90α (HSP90AAl)、MMP2、MMP9、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平.结果:与配对癌旁组织和SV-HUC-1相比,膀胱癌组织和T24细胞中IFIT3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.001).与正常T24细胞相比,T24/DDP细胞中的IFIT3 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.001).与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的IC50值和侵袭细胞数显著降低,而细胞凋亡率显著升高(P＜0.05).与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白相对表达量显著降低,而Bax和Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05).String数据库显示,IFIT3与HSP90AA1基因存在互作关系.与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的HSP90α(HSP90AAl)表达水平显著降低(P＜0.05).结论:下调IFIT3的表达可抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭,并促进细胞凋亡,下调IFIT3可部分通过抑制HSP90α (HSP90AA1)的表达来降低膀胱癌细胞对顺铂的耐药性.
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