论文部分内容阅读
本实验对重组PyNPase基因工程茵诱导表达，超声波破碎后上清波进行了分离与纯化，采用革兰氏染色法观察和活茵计数法检测破碎效率。超声波破碎上清液经Ni-亲和层析进行分离纯化，最后用SDS—PAGE和磷酸化反应进行了鉴定。结果表明，高效表达的PyNPase重组茵，在工作5s，间歇5s，工作50min，破碎效率最佳。SDS—PAGE检测电泳纯度达到85％以上，条带模糊；分离获得的PyNPase能使尿苷磷酸化为尿嘧啶，具有磷酸化酶活性，但上清液中可溶性PyNPase的含量比较低。