Rap2c基因真核表达质粒的构建与表达

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yiwen_yu
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目的:为了探讨Rap2c基因与肺癌发生的关系,克隆人Ras家族小G蛋白Rap2c的cDNA,构建其真核表达质粒并在人肺癌细胞株A549和H1299中表达。方法人骨肉瘤细胞株U2OS提取细胞总RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)逆转录成cDNA,PCR扩增Rap2c,酶切后插入pcDNA3.1(+)构建真核表达质粒 pcD-NA3.1(+)-Rap2c,采用酶切及测序鉴定。重组质粒转染A 549和H 1299细胞,Western blot 检测其目的基因表达。结果双酶切及测序结果显示重组质粒pcDN
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