棉花咖啡酸-O-甲基转移酶基因的克隆及特征分析

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lalabingku
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】克隆棉花木质素合成关键酶基因GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3全长cDNA序列,分析其在不同组织部位的表达情况并进行原核表达研究。【方法】根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的EST序列设计引物,采用RT-PCR技术克隆基因,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定的氨基酸序列进行分析。采用半定量RT-PCR方法研究GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3在不同组织中的表达。构建了基因的原核表达载体,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。【结果】从发育的棉花纤维中克隆了3个COMT基因cDNAs,GhCOMT1(GenBank登录号为FJ479708)、GhCOMT2(GenBank登录号为FJ479709)和GhCOMT3(GenBank登录号为FJ848869)分别具有1101bp、1098bp、1071bp的开放阅读框,各自编码366、365和356个氨基酸。GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3在棉花各个组织中都有表达,GhCOMT1和GhCOMT2在根部的表达量最高,GhCOMT3在茎中表达量最高。SDS-PAGE电泳分析表明,3个蛋白的最佳诱导表达条件均为0.2mmol·L-1IPTG在37℃下诱导6h。【结论】从棉花中克隆了3个木质素合成关键酶基因GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3,为进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。
其他文献
社会的进一步发展,促使现阶段我国建筑工程数量和规模不断提升,此种背景下,作为工程建设中的一个重要组成部分,测绘作业被提出更高的要求,为保证测绘质量,测绘新技术被广泛应
现如今,超高层建筑的结构类型多样,框架-核心筒结构尤为常见,而钢管混凝土柱的应用也越来越广泛.对于超高层建筑来说,浇筑钢管柱对砼的要求较高,需具有良好流动性、可泵性、
动漫文化已成为视觉时代的重要文化形态之一,它是科技、艺术、思想的高度融合,涉及到诸多学科的内容,所传达的信息十分丰富。因此可以运用哲学、心理学、文化研究等理论从不
弗朗茨·泽拉菲库斯·彼得·舒伯特,奥地利著名的作曲家,19世纪浪漫主义音乐的代表性人物,在欧洲音乐史上具有举足轻重的地位,他开创了浪漫主义声乐作品的先河,其器乐作品具
【目的】分析弋阳县土壤养分分布状况,划分弋阳县土壤肥力等别,绘制肥力等别图;创建施肥建议模型,得出各区明确而可行的水稻最佳经济效益施肥方案并得到相应施肥方案图。【方
3月24日下午,市人大常委会举行“改革与市情”报告会,市人大常委会主任刘云耕传达了十一届全国人大一次会议的情况,主要特点和中央领导同志在会议期间的重要讲话精神。
随着我国经济的不断发展,我国的科技实力也在不断地提高。作为社会历史以及科技发展的必经阶段,我国不可避免地进入了大数据时代,大数据也是这个时代的标志,因此要充分理解大
移动互联网发展迅猛,使用移动互联网来观看视频直播十分流行。为此,笔者使用XCode开发工具,并且使用Objective-C语言编写了一款视频直播软件,这是一款免费互动视频软件。这款软件
材料是保证工程顺利实施的关键要素之一,确保工程材料质量是提高工程建设质量的重中之重,因此加强施工现场的材料管理具有非常重要的意义。本文对当前公路工程建设过程中材料管
建筑是现代人主要的工作和生活场所,伴随经济发展水平的提高,人们对建筑质量的要求逐渐提高,房屋设计、施工管理、材料选择等会在一定程度上影响防水工程质量,由此造成的建筑