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目的
观察基底样乳腺癌(BLBC)特异性微小RNA(miRs)及其靶基因和生物学功能。
方法通过荧光素酶实验验证靶基因,逆转录定量-聚合酶链反应(QRT-PCR)、Western印迹和免疫组织化学(IHC)分析miR及其靶基因表达,流式细胞检测细胞凋亡。
结果荧光素酶实验示miR-205靶向调控KLF12(P=0.001 6)。QRT-PCR示,miR-205在MDA-MB-468细胞(P=0.007)和BLBC肿瘤组织中(P=0.007 4;n=3)呈低表达;KLF12在MDA-MB-468细胞中为高表达(P=0.003 9);过表达miR-205,miR-205在MDA-MB-468表达显著升高(P=0.000),KLF12在MDA-MB-468表达显著减少(P=0.038)。Western印迹示BLBC肿瘤组织中KLF12蛋白表达显著升高(P=0.008 3;n=9)。凋亡实验示过表达miR-205,显著促进MDA-MB-468细胞凋亡(P=0.0061)。
结论MiR-205是BLBC特异性miR,通过负性靶向调控原癌基因KLF12和促进细胞凋亡具有抑癌基因的功能。MiR-205和KLF12为BLBC提供潜在的诊断分子标志物和新的治疗思路。