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目的：利用哺乳动物细胞悬浮培养表达系统分泌表达人源Dickkopf-1（DKK1）蛋白,纯化蛋白并制备特异性抗体。方法：构建DKK1真核表达载体pCMVcStrep-DKK1,并借助脂质体将载体瞬时转染入Free-Style293-F细胞（无血清培养）,ELISA和蛋白印迹法检测DKK1蛋白表达量。利用亲和层析法纯化DKK1蛋白,Wnt信号通路荧光素酶报告系统检测其生理活性。以纯化的DKK1蛋白免疫BALB/c小鼠获得相应抗体,并初步鉴定其抗原特异性。结果：DKK1蛋白分泌表达在Free-Style293