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目的
分离克隆烟曲霉组氨酸激酶基因,进一步探讨其在侵袭性感染中的作用.
方法基于组氨酸激酶保守区设计简并引物,通过逆转录-聚合酶链反应获得特异性扩增产物,对目的产物克隆、测序.通过Blast分析进行相似性比较.以获得的目的 基因片段作为探针,通过Northern杂交比较该基因在体外与体内感染时表达的差异.
结果逆转录-聚合酶链反应获得2个片段,长度分别为171bp、305bp,其中305bp片段与构巢曲霉tesA基因的同源性>80%.该基因在小鼠侵袭性肺曲霉病中表达水平明显增加.
结论烟曲霉组氨酸激酶基因的表达可能有助于其在体内存活,该基因可能是烟曲霉潜在的毒力基因.