【摘 要】
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目的构建核糖体结合蛋白1(RPN1)的干扰慢病毒载体,建立下调RPN1表达的肝癌细胞系。方法运用分子克隆针对RPN1基因构建干扰慢病毒载体,通过与病毒包装辅助质粒共感染293T细胞
【基金项目】
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广东省自然科学基金-博士启动项目(2017A030310625),惠州市科技计划(医疗卫生)项目(2017Y051)
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目的构建核糖体结合蛋白1(RPN1)的干扰慢病毒载体,建立下调RPN1表达的肝癌细胞系。方法运用分子克隆针对RPN1基因构建干扰慢病毒载体,通过与病毒包装辅助质粒共感染293T细胞包装病毒,高速离心浓缩病毒,免疫荧光方式测定病毒滴度,感染Huh7.5.1肝癌细胞系,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定病毒干扰效果。结果成功构建并包装RPN1 RNA干扰慢病毒,病毒滴度为2×10^9TU/mL,感染Huh7.5.1细胞后阳性率大于90.0%。相对于阴性对照,RPN1 RNA干扰慢病毒组RPN1
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