大鼠PAX2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及沉默效果

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目的:构建PAX2特异性shRNA 干扰慢病毒载体并观察其对大鼠肾小管上皮细胞( NRK52E)中PAX2基因的沉默效果。方法采用PAX2基因 RNAi靶点序列合成靶序列的 Oligo DNA,退火形成双链 DNA,与pGCSIL-GFP载体连接产生 shRNA慢病毒载体,经 PCR筛选阳性克隆进行 DNA 测序鉴定。用脂质体转染法将质粒共转染293T 细胞,将包装产生的慢病毒颗粒感染NRK52E 细胞,RT-PCR、Western 印迹检测PAX2 mR-NA 和蛋白的表达。结果 PCR与DNA测序证实
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