观察全反式维甲酸(ATRA)和骨形态发生蛋白-9(BMP-9)对骨肉瘤细胞143B细胞株增殖能力的影响。
方法选择人骨肉瘤细胞143B细胞株作为研究对象分为ATRA组(单用ATRA)、BMP-9组(单用BMP-9)、联合组(联合应用ATRA和BMP-9)和对照组(二甲基亚砜),采用噻唑蓝(MTT)和流式细胞仪分析细胞增殖,采用Western blot分析细胞增殖及不同组别处理方案之后143B细胞株BMP-9蛋白的表达。
结果ATRA组在10 μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为(94.1±1.6)%、(93.0±1.4)%、(86.5±1.7)%,在20 μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为(82.6±2.3)%、(76.5±2.1)%、(68.4±2.4)%,在40 μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为(72.4±3.5)%、(65.3±3.1)%、(60.2±2.2)%,在60 μmol/L浓度下24、48、72 h的增殖率为(64.9±2.9)%、(53.7±4.1)%、(41.5±4.9)%,ATRA能够有效抑制143B细胞的增殖,呈浓度依赖性,且随着药物作用时间增加抑制作用增强(P=0.015),浓度为20 μmol/L时ATRA已经能明显抑制143B细胞的生长(P=0.009);处理48 h后,ATRA组在20 μmol/L浓度下BMP-9 mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.1±0.2、1.4±0.1;在40 μmol/L浓度下BMP-9 mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.7±0.3、2.0±0.3;在60 μmol/L浓度下BMP-9 mRNA表达水平和BMP-9蛋白表达水平分别为2.9±0.5、2.3±0.6,无论何种浓度下的ATRA组都会表现出143B细胞中BMP-9表达水平的增高(P=0.027),且呈浓度依赖性;BMP-9组24、48、72 h的细胞增殖率为(117.4±3.5)%、(119.4±2.4)%、(116.9±3.0)%,ATRA组(40 μmol/L)24、48、72 h的细胞增殖率为(72.4±3.5)%、(65.3±3.1)%、(60.2±2.2)%,联合组24、48、72 h的细胞增殖率为(51.2±2.4)%、(43.9±2.7)%、(36.5±4.1)%,BMP-9能够促进143B细胞的增殖(P=0.000),但联合ATRA应用后被翻转,增强了ATRA的抗增殖效果。
结论ATRA能够抑制骨肉瘤143B细胞的增殖,同时上调内源性BMP-9水平,单独引入外源性的BMP-9会促进骨肉瘤143B细胞增殖,但联合应用ATRA和BMP-9则能够翻转BMP-9的作用,增强ATRA对143B细胞增殖抑制的效果。