【摘 要】
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目的 通过检测癌性腹水模型大鼠肝功能指标、血清生物标志物含量及肝细胞色素P450酶(cytochrome P450) CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1的基因、蛋白表达,探讨醋甘遂与炙甘草配伍对癌性腹水大鼠CYP450酶的调节作用,从而揭示二者配伍的作用实质.方法 将雄性Wistar大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、炙甘草组(免煎颗粒剂)、醋甘遂组(研末)、炙甘草-醋甘遂组(草遂组)、甘遂半夏汤组.除正常组外,其余各组腹腔注射Walker-256肿瘤细胞株复制癌性腹水模型,连续给药14 d.实
【机 构】
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河北中医学院药学院,河北石家庄050091
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目的 通过检测癌性腹水模型大鼠肝功能指标、血清生物标志物含量及肝细胞色素P450酶(cytochrome P450) CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1的基因、蛋白表达,探讨醋甘遂与炙甘草配伍对癌性腹水大鼠CYP450酶的调节作用,从而揭示二者配伍的作用实质.方法 将雄性Wistar大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、炙甘草组(免煎颗粒剂)、醋甘遂组(研末)、炙甘草-醋甘遂组(草遂组)、甘遂半夏汤组.除正常组外,其余各组腹腔注射Walker-256肿瘤细胞株复制癌性腹水模型,连续给药14 d.实验结束后取材,用生化法检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性以及总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测谷氨酸脱氢酶(GLDH)、苹果酸脱氢酶(MDH1)、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、对氧磷酶(PON1)含量,HE染色观察肝组织病理形态学变化,免疫组织化学法检测细胞色素氧化酶CYP3A1、CYP2E1蛋白表达,采用RT-qPCR技术检测CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1的基因表达.结果 与正常组比较,模型组AST、ALT、TBIL、DBIL、AKP、GLDH、MDH1、PNP水平明显升高(P＜0.05),PON1水平明显下降(P＜0.05);与模型组比较,炙甘草组、草遂组、甘遂半夏汤组PON1含量明显升高(P＜0.05).RT-qPCR及免疫组织化学结果显示CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1基因及蛋白表达与正常组比较明显升高(P＜0.05);与模型组比较,各给药组均能下调CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1的基因或蛋白表达(P＜0.05).HE染色结果显示,与模型组比较,炙甘草组、草遂组及甘遂半夏汤组肝索紊乱减少,肝血窦扩张减少.结论 本实验提示醋甘遂与炙甘草只有在特定条件下,运用中医的辨证论治思维配伍应用才能起到减毒的作用.醋甘遂与炙甘草配伍可能通过抑制细胞色素氧化酶的基因、蛋白表达,提高PON1含量,降低氧化应激,起到对肝脏的保护作用.
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