【摘 要】
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目的:探讨Atf3在大鼠妊娠期胰岛β细胞中的表达及其对体外催乳素作用下INS-1细胞增殖的影响.方法:运用RT-PCR,Real-time PCR和Western blotting检测大鼠妊娠期Atf3 mRNA及蛋
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏,南京,210029
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目的:探讨Atf3在大鼠妊娠期胰岛β细胞中的表达及其对体外催乳素作用下INS-1细胞增殖的影响.方法:运用RT-PCR,Real-time PCR和Western blotting检测大鼠妊娠期Atf3 mRNA及蛋白的表达;MTF法测定不同浓度催乳素作用下INS-1细胞的增殖情况;RT-PCR检测催乳素作用不同时间后INS-1细胞Atf3 mRNA的表达;Western blotting检测相应蛋白表达.结果:与正常未孕组相比,孕10.5天组Atf3 mRNA表达明显增强,孕14.5天时降至正常未孕组水平.Atf3蛋白在孕期表达亦呈一过性增强,于孕10.5天达高峰.体外不同浓度催乳素(50～1 000 ng/mb作用24 h后,INS-1细胞增殖显著增加,且呈浓度依赖性.200 ng/ml催乳素作用3 h,Aft3 mRNA表达开始增加,6 h达高峰,其后又复降低;蛋白表达则从6 h开始上调,12 h显著增加,一直持续至24 h.结论:转录因子Atf3在大鼠妊娠期表达一过性增强,且时相上早于胰岛增殖的高峰(孕14.5天),提示它可能与胰岛再生相关.另外,催乳素可促进INS-1细胞增殖,并伴随Atf3表达的相应增加,提示Atf3在催乳素介导的细胞增殖效应中发挥重要作用,且于早期即启动.
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