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目的
构建趋化因子受体3（chemokine receptor3，CCR3）基因RNA干扰（RNA interference，RNAi）慢病毒表达载体，了解其对嗜酸粒细胞的作用。
方法针对小鼠CCR3基因序列，设计出RNAi的靶序列，退火形成双链DNA，与经MluI、SacI、EcoRI、HindIll、BamHI和XhoI进行酶切后的pLVX-shRNA2-m载体连接产生短发夹RNA（shoa hairpin RNA，shRNA）慢病毒载体。应用shRNA慢病毒载体转染293T细胞及嗜酸粒细胞，测定病毒滴度，实时定量聚合酶链反应检测嗜酸粒细胞中CCR3基因mRNA的表达情况。
结果成功构建了shRNA-mCCR3慢病毒载体，经测序与设计合成的靶向链完全一致。荧光显微镜下观察293T细胞感染效率大于90%，病毒滴度为4×10^8 TU/ml；对嗜酸粒细胞CCR3基因沉默效率为86.7%。
结论成功构建CCR3基因RNAi慢病毒表达载体，为后续感染嗜酸粒细胞，探索其在变应性鼻炎发生和发展中的作用奠定了基础。