【摘 要】
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目的 结合微流控芯片环介导恒温扩增技术（LAMP）,建立可同时检测粪便中8种肠道致病菌的微流控芯片LAMP检测方法，为感染性腹泻的临床诊断提供依据。方法 根据8种肠道致病菌（志贺菌、沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌）的特异目的基因分别设计微流控芯片LAMP引物，加入EvaGreen荧光染料，采用微流控芯片LAMP对8种
【基金项目】
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国家重点研发计划（2018YFC1603705）；
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目的 结合微流控芯片环介导恒温扩增技术（LAMP）,建立可同时检测粪便中8种肠道致病菌的微流控芯片LAMP检测方法，为感染性腹泻的临床诊断提供依据。方法 根据8种肠道致病菌（志贺菌、沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌）的特异目的基因分别设计微流控芯片LAMP引物，加入EvaGreen荧光染料，采用微流控芯片LAMP对8种肠道致病菌同时进行实时荧光监测；提取8种肠道致病菌的基因组DNA,对建立微流控芯片LAMP的特异度和灵敏度进行评价；制备模拟粪便样本对该技术的最低检出限进行评价。结果 微流控芯片LAMP可实现8种肠道致病菌的特异性检测，对福氏志贺菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌和肠产毒素大肠埃希菌的检测灵敏度可达100 CFU/mL;对模拟粪便样本中福氏志贺菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌的最低检出限均为100 CFU/mL;对空肠弯曲菌和肠聚集性大肠埃希菌的最低检出限为1 000 CFU/mL。结论 该实验建立的微流控芯片LAMP特异性好、灵敏度高、结果准确，可用于粪便中8种肠道致病菌的同步快速检测。
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