【摘 要】
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目的 探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响.方法 采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描显微镜检测内源LCN2在乳腺癌细胞中的表达及定位.构建过表达LCN2的MCF-7、T47D细胞系,采用Western blotting检测与上皮间质转化(EMT)发生相关的标志物E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、波
【机 构】
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中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室,国家卫生健康委员会细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室,沈阳 110122
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目的 探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响.方法 采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描显微镜检测内源LCN2在乳腺癌细胞中的表达及定位.构建过表达LCN2的MCF-7、T47D细胞系,采用Western blotting检测与上皮间质转化(EMT)发生相关的标志物E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)的蛋白表达情况.Transwell检测LCN2对乳腺癌细胞T47D迁移能力的影响.结果 LCN2在MCF-7,T47D及ZR-75-30乳腺癌细胞系中低表达,在MDA-MB-231中中等表达,在ZR-75-1细胞系中高表达;免疫组织化学以及激光共聚焦扫描显微镜证实LCN2主要定位于细胞质;成功构建了过表达LCN2的乳腺癌细胞系MCF-7和T47D,Western blotting检测发现在过表达LCN2的T47D细胞系中E-cadherin和Claudin-1蛋白表达明显降低,而Slug以及Vimentin表达明显增高.过表达LCN2的T47D细胞系迁移能力增强.结论 LCN2在不同乳腺癌细胞系中表达水平不同,主要定位于乳腺癌细胞质,LCN2能促进乳腺癌细胞的迁移,可能通过诱发EMT促进乳腺癌细胞的侵袭转移.
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