【摘 要】
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目的探讨缺氧环境下自噬对大鼠内皮祖细胞(EPCs)迁移、凋亡的影响。方法采用密度梯度离心法分离获取EPCs并用荧光双染法鉴定大鼠骨髓源性EPCs。为检测缺氧对EPCs迁移、凋亡及
【机 构】
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重庆陆军军医大学新桥医院全军心血管病研究所
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目的探讨缺氧环境下自噬对大鼠内皮祖细胞(EPCs)迁移、凋亡的影响。方法采用密度梯度离心法分离获取EPCs并用荧光双染法鉴定大鼠骨髓源性EPCs。为检测缺氧对EPCs迁移、凋亡及自噬水平的影响,将细胞分为4组:常氧培养组(即缺氧0h组)、缺氧1h组、缺氧3h组和缺氧6h组,用Transwell小室和流式细胞术分别检测各组细胞迁移和凋亡情况,Western blotting检测EPCs自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和p62的改变。为检测沉默自噬后缺氧对EPCs的影响,将细胞分为4组:缺氧0h组、缺氧3h组、缺氧3h+沉默Atg7(Sh Atg7)组和Sh Atg7组,再次观察EPCs迁移及凋亡的变化。结果与缺氧0h组比较发现,缺氧3h及6h后EPCs迁移能力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05);且缺氧3h及6h后EPCs内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达明显升高(P<0.05),p62表达明显降低(P<0.05)。Sh Atg7抑制自噬后发现,与缺氧3h组比较,缺氧3h+Sh Atg7组的EPCs迁移能力进一步降低(P<0.05),细胞凋亡率进一步升高(P<0.05)。结论缺氧环境下自噬可促进EPCs迁移并减少凋亡,可对EPCs存活发挥保护作用。
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