【摘 要】
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【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒（RHDV）感染性cDNA真核表达载体。【方法】在前期构建的RHDV感染性克隆基础上,将其全长cDNA分子分为3段,利用单一的限制性内切酶将其依次
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院,浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,中国农业科学院上海兽医研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30800045,30670074,30870114）,浙江省自然科学基金项目“家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金”（Y305047）
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【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒（RHDV）感染性cDNA真核表达载体。【方法】在前期构建的RHDV感染性克隆基础上,将其全长cDNA分子分为3段,利用单一的限制性内切酶将其依次克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）上,构建RHDV感染性cDNA真核表达质粒,将该质粒转染BHK-21细胞,传3代后,对产生明显细胞病变的细胞冻融液进行RT-PCR检测。【结果】RHDV感染性cDNA真核表达载体构建成功。构建质粒转染的BHK-21细胞出现明显细胞病变,RT-PCR检测结果表明,RHDV拯救成功。【结论】
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