促微管聚合蛋白3在肝癌中的表达及其对肝癌细胞生物学功能的影响

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目的 检测促微管聚合蛋白3(TPPP3)在肝癌组织中的表达,观察靶向沉默TPPP3对肝癌细胞生物学功能的影响.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测23例肝癌组织和配对癌旁组织,Western blot和FQ-PCR技术检测肝癌细胞和正常永生化的肝细胞中TPPP3的表达.设计并筛选靶向沉默TPPP3的有效短发夹RNA(shRNA),并选取TPPP3表达量较高的SMMC-7721细胞和QGY-7703细胞进行功能实验.细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;Transwell实验检测细胞迁移能力的改变;裸鼠皮下移植瘤实验检测TPPP3的体内生物学效应;裸鼠肺转移试验检测TPPP3对在体肝癌转移能力的影响.结果 TPPP3在肝癌组织中的表达量(0.374±0.046)显著高于配对癌旁组织(0.113 ±0.044,P<0.01),在肝癌细胞中的表达量显著高于正常肝细胞;靶向沉默TPPP3可显著抑制肝癌细胞的增殖能力(QGY-7703:0.873 ±0.044比0.631±0.037;SMMC-7721:0.829±0.049比0.502±0.048)并增加细胞的凋亡率[SMMC-7721:(8.702±1.131)%比(4.213±0.098)%;QGY-7703:(14.731±2.247)%比(7.013±1.098)%];靶向沉默TPPP3可抑制肝癌细胞的转移能力(SMMC-7721:105±23比75±14,P<0.05;QGY-7703:94±20比42±10,P<0.01);靶向沉默TPPP3可显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长[肿瘤体积:(3 062.800±694.268) mm3比(850.200±469.387) mm3,P<0.01;肿瘤重量:(1.401±0.202)g比(0.803±0.097)g,P<0.01]以及肺转移(1.400±1.140比0.000±0.000,P<0.01).结论 肝癌中TPPP3过表达,TPPP3通过凋亡依赖的方式调控细胞增殖.此外,TPPP3还可调控癌细胞转移和体内肿瘤生长.
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