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利用ＰＣＲ方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）基因进行了修饰，在其５＇端删去约５００ｂｐ的非编码区，仅保留ＡＴＧ上游７个ｂｐ。将修饰后的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入到带有痘苗病毒天坛株ＴＫ基因区段的痘苗表达质粒ｐＪＳＡ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７．５ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ￣＋痘苗病毒天坛株感染的ＴＫ￣－１４３细胞，通过同源重组机制和标志基因ＬａｃＺ产物的蓝斑显色作用，以及ＢｕｄＲ试剂对ＴＫ表型的选择压力，筛选出整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组