研究微小RNA-133a（miR-133a）对L-型钙通道α1C亚基的调控作用及其对心肌细胞肥大的影响。

培养乳鼠心肌细胞，异丙肾上腺素（ISO）诱导心肌细胞肥大。相差显微镜和Leica图像分析软件测量心肌细胞表面积。逆转录实时定量PCR（qRT-PCR）和Western blot法分别检测心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链（β-MHC)、miR-133a和α1C mRNA和蛋白表达水平。转染miR-133a模拟物（mimic）上调心肌细胞miR-133a表达，观察对心肌细胞肥大的影响。应用网络数据库Targetscan预测miR-133a的靶基因。构建含α1C 3′UTR报告基因质粒和miR-133a瞬时共转染HEK293细胞，验证α1C为miR-133a靶基因。应用α1C RNAi干扰α1C蛋白表达，明确α1C亚基在心肌细胞肥大中的作用。应用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞内钙离子浓度。

（1）在ISO诱导的心肌细胞肥大过程中，miR-133a表达显著下降（P<0.01）。miR-133a mimic 转染心肌细胞上调miR-133a表达，心肌细胞表面积、ANP和β-MHC mRNA表达均明显降低（P均<0.01）。（2）网络数据库预测显示α1C为miR-133a的潜在靶点。将miR-133a和含α1C 3′UTR报告基因共转染HEK293细胞，其荧光值显著降低（P<0.01）。转染miR-133a mimic使心肌细胞miR-133a表达上调，可明显抑制α1C蛋白的表达（P<0.05）。（3） 在ISO诱导心肌细胞肥大中α1C表达明显增加（P<0.05）。应用RNAi技术下调α1C表达可明显抑制心肌细胞表面积、ANP和β-MHC mRNA表达的增加（P分别<0.01、0.05和0.05）。（4）应用RNAi下调α1C表达或应用miR-133a mimic上调miR-133a表达，心肌细胞内钙离子浓度均明显降低（P均<0.01）。

α1C亚基为miR-133a的靶基因。miR-133a可能通过负性调控L-型钙通道α1C蛋白的表达，降低细胞内钙离子浓度、抑制心肌细胞肥大。