【摘 要】
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目的 探讨间充质干细胞（MSC）包裹胰岛对胰岛移植即刻经血液介导的炎症反应（IBMIR）的影响。方法 将经示踪剂标记的MSC与人胰岛放入超低吸附培养皿，间隔0.5 h吹打混匀2次，之后置37℃、5%CO2条件下孵育培养24 h，实现MSC包裹胰岛，并检测MSC包裹胰岛的效果及胰岛的体外功能。体外构建血液循环管型模型，空白对照组加入0.2 m L胰岛培养液，胰岛组加入800胰岛当量未包裹的胰岛，
【基金项目】
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广西科技基地和人才专项（桂科AD22035122）； 广西研究生教育创新计划项目（YCSW2022355、YCXJ2021091）； 广西中医药大学细胞与组织工程临床研究高层次人才培育创新团队（2022B008）；
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目的 探讨间充质干细胞（MSC）包裹胰岛对胰岛移植即刻经血液介导的炎症反应（IBMIR）的影响。方法 将经示踪剂标记的MSC与人胰岛放入超低吸附培养皿，间隔0.5 h吹打混匀2次，之后置37℃、5%CO2条件下孵育培养24 h，实现MSC包裹胰岛，并检测MSC包裹胰岛的效果及胰岛的体外功能。体外构建血液循环管型模型，空白对照组加入0.2 m L胰岛培养液，胰岛组加入800胰岛当量未包裹的胰岛，MSC包裹组加入800胰岛当量MSC包裹的胰岛，37℃条件下循环60 min。在0、30、60 min 3个时间点各取0.5 m L血液进行血常规检测。循环60 min后将血液用70μm滤网过滤，收集血浆、血凝块及胰岛。血凝块及胰岛进行苏木素-伊红（HE）染色免疫组织化学（免疫组化）染色，观察组织形态学改变及CD11b阳性细胞在胰岛周围聚集情况。使用酶联免疫吸附试验检测血浆中凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、组织因子（TF）、C3a、C5b-9、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α、单核细胞趋化蛋白（MCP）-1、IL-8含量。结果 MSC和胰岛共同孵育24 h后胰岛可以被MSC包裹，包裹程度约80%。胰岛组和MSC包裹组血凝块和胰岛周围均存在较多中性粒细胞和单核细胞，MSC包裹组较胰岛组CD11b阳性细胞少。与全血共孵育0、30、60 min后，MSC包裹组和胰岛组血小板、中性粒细胞和单核细胞数量均下降，且随着时间延长逐渐减少。与空白组比较，MSC包裹组血小板、单核细胞、中性粒细胞数量较少，TF含量较高；与胰岛组比较，MSC包裹组血小板、单核细胞、中性粒细胞数量较多，TAT、TF含量较低，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。与空白组比较，MSC包裹组C3a、C5b-9、IL-6、TNF-α、IL-8表达水平较高；与胰岛组比较，MSC包裹组C3a、C5b-9、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8、MCP-1表达水平较低，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论 MSC包裹胰岛可通过减少胰岛TF在血液中的暴露，在凝血反应阶段减轻IBMIR，从而减少移植早期胰岛移植物的损伤和丢失。
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