论文部分内容阅读
目的 探讨布罗莫结构域抑制剂JQ1抑制急性髓系白血病细胞株U937的作用机制及对STAT-5信号转导途径的影响.方法 各实验组取对数生长期U937细胞,分别加入0.2、1.0、4.0μmol/L JQ1,同时设置不加JQ1的空白对照组,培养48 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测黏着斑激酶(FAK)、P21活化激酶(PAK1)mRNA的表达水平,蛋白质印迹法分析细胞STAT-5蛋白的表达.结果 不同浓度JQ1对U937细胞的增殖均有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;不同浓度JQ1可诱导U937细胞凋亡,且呈剂量依赖性.不同浓度(0.2、1.0、4.0μmol/L)JQ1处理U937细胞48 h后均能降低FAK mRNA和PAK1 mRNA表达,FAK mRNA的表达量分别为0.417±0.066、0.140±0.026、0.027±0.006(F=454.651,P=0.000),PAK1 mRNA的表达分别为0.533±0.045、0.080±0.010、0.010±0.001(F=2434.610,P=0.000);STAT-5蛋白表达也被明显地抑制,在48 h后对照组STAT-5蛋白相对含量为1.00±0.21,不同浓度(0.2、1.0、4.0μmol/L)JQ1组中STAT-5蛋白相对含量分别为0.71±0.19、0.62±0.16、0.53±0.14(F=263.135,P=0.000).结论 JQ1能有效地抑制急性髓系白血病细胞株U937增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过STAT-5信号转导途径来实现的.