【摘 要】
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目的:探讨miR-1256靶向COPB2调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的分子机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot方法检测胰腺癌组织、癌旁组织、人胰腺癌细胞系中miR-1256和COPB2的表达.将 miR-1256 mimics、miR-con、si-COPB2、si-con、miR-1256+pcDNA、miR-1256+pcD-NA+COPB2分别转染PANC-1和CFPAC-1细胞,MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率.采用双荧光素酶报告基因实验和Western blot
【机 构】
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重庆市江津区中心医院肝胆外科 重庆402260;成都医学院附属医院肝胆外科 四川 成都610083;重庆市江津区中心医院普外科二病区 重庆402260
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目的:探讨miR-1256靶向COPB2调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的分子机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot方法检测胰腺癌组织、癌旁组织、人胰腺癌细胞系中miR-1256和COPB2的表达.将 miR-1256 mimics、miR-con、si-COPB2、si-con、miR-1256+pcDNA、miR-1256+pcD-NA+COPB2分别转染PANC-1和CFPAC-1细胞,MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率.采用双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-1256对COPB2的靶向作用.结果:与癌旁组织相比,胰腺癌组织miR-1256表达显著降低,而COPB2表达显著升高(P＜0.05).与正常胰腺细胞相比,PANC-1和CFPAC-1细胞中miR-1256表达显著降低,COPB2表达著升高(P＜0.05).与miR-con组比较,miR-1256组PANC-1和CFPAC-1细胞的活力均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P＜0.05);与si-con组比较,si-COPB2组PANC-1和CFPAC-1细胞的活力均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P＜0.05).COPB2是miR-1256的靶基因,miR-1256负向调控COPB2表达.与miR-1256+ pcDNA组比较,miR-1256+pcDNA+ COPB2组PANC-1和CFPAC-1细胞的活力均显著升高,细胞凋亡率均显著降低(P＜0.05).结论:miR-1256可通过下调COPB2表达抑制胰腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡.
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