苏云金芽胞杆菌质粒pBMB2062的克隆及遗传稳定载体的构建

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从苏云金芽胞杆菌YBT-1520菌株中克隆到1个小质粒pBMB2062,序列分析表明该质粒由2062个核苷酸组成。该质粒含2个编码框(orf1和orf2),可分别编码由289个氨基酸和80个氨基酸组成的蛋白质。这2个潜在的蛋白质分别与质粒的复制启始蛋白和复制蛋白同源。PBMB2062与2个已知同源质粒之间有23个核苷酸的差异;这些差异引起了orf1编码框的变化。cDNA合成和PCR检测显示与pBMB2062的orf1编码框对应的mRNA是存在的。利用该质粒构建了穿梭载体并表达了杀虫晶体蛋白基因,重组质粒在无选择压力下可稳定遗传40多代,说明该质粒可用于构建稳定遗传的质粒载体。
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