【摘 要】
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目的建立阿霉素（ADR）耐药Raji细胞株（Raji/A)，检测线粒体抗增殖蛋白(Prohibitin，PHB）及微小RNA-27a (miR-27a）在Raji细胞及其敏感株（Raji/S）中的表达变化并探讨其临床意义。方法建立Raji/A细胞株，采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率，采用相差显微镜观察细胞一般形态并计数，采用RT-PCR方法检测Raji/A及Raji/S细胞中PHB mRNA与m
【机 构】
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250021 济南，山东大学附属省立医院血液科,250021 济南，山东大学附属省立医院血液科,250021 济南，山东大学附属省立医院血液科,
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目的建立阿霉素（ADR）耐药Raji细胞株（Raji/A)，检测线粒体抗增殖蛋白(Prohibitin，PHB）及微小RNA-27a (miR-27a）在Raji细胞及其敏感株（Raji/S）中的表达变化并探讨其临床意义。
方法建立Raji/A细胞株，采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率，采用相差显微镜观察细胞一般形态并计数，采用RT-PCR方法检测Raji/A及Raji/S细胞中PHB mRNA与miR-27a的表达水平，采用Western blot法检测PHB1蛋白在Raji/A及Raji/S细胞线粒体中的表达水平。
结果不同浓度ADR处理48 h，Raji/A及Raji/S细胞的半数抑制浓度(IC50）分别为344.17及1.12 μg/ml，耐药倍数为306.47倍。Raji/A与Raji/S细胞经4 μg/ml ADR处理24 h，凋亡率分别为（13.48±2.20)％及（69.89±1.94)%，差异有统计学意义(P<0.05)。PHB1 mRNA在Raji/A细胞中的表达明显高于Raji/S细胞，为(7.66±3.27)倍(P<0.05)；PHB2 mRNA在Raji/A细胞中的表达是Raji/S的(1.25±0.47）倍，差异无统计学意义(P>0.05)；miR-27a在Raji/A细胞中的表达明显高于Raji/S细胞，为（128.40±31.59)倍(P<0.05)。PHB1蛋白在Raji/A及Raji/S细胞线粒体中的相对表达量分别为9.87±0.22及1.96±0.06(P<0.05)。
结论成功构建稳定Raji/A细胞模型，PHB1及miR-27a在Raji/A细胞中表达升高，其高表达可能参与Raji细胞ADR耐药机制。
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