【摘 要】
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目的构建骨形成蛋白(BMP)7重组腺病毒,使其转染骨髓间充质干细胞并在细胞内得到表达.方法将BMP7基因克隆到转移载体pAdTrack-CMV中,在细菌BJ5183中与pAdEasy腺病毒基因组进行同源重组,得到BMP7重组腺病毒基因组,通过转染HEK293细胞包装出重组腺病毒.利用BMP7重组腺病毒转染分离纯化后的骨髓间充质干细胞,鉴定BMP7在细胞内的表达.结果经过多聚酶链反应(PCR)及酶切
【机 构】
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100037,北京,解放军304医院骨科,全军骨科研究所,军事医学科学院微生物及流行病研究所,
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目的构建骨形成蛋白(BMP)7重组腺病毒,使其转染骨髓间充质干细胞并在细胞内得到表达.方法将BMP7基因克隆到转移载体pAdTrack-CMV中,在细菌BJ5183中与pAdEasy腺病毒基因组进行同源重组,得到BMP7重组腺病毒基因组,通过转染HEK293细胞包装出重组腺病毒.利用BMP7重组腺病毒转染分离纯化后的骨髓间充质干细胞,鉴定BMP7在细胞内的表达.结果经过多聚酶链反应(PCR)及酶切鉴定证明获得了BMP7转移质粒pAdTrack-BMP7和BMP7重组腺病毒基因组,并包装出重组腺病毒.逆转录PCR和免疫组织化学证明BMP7在重组腺病毒转染后的骨髓间充质干细胞中得到了表达.结论 BMP7重组腺病毒的构建和在骨髓间充质干细胞中的表达,为BMP7基因治疗的研究奠定了基础.
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