稳定表达Notch1胞内结构域肺腺癌细胞株的构建及鉴定

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yqhbyctu

【摘要】

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目的构建Notch1胞内结构域（N1ICD）稳定表达的肺腺癌A549细胞株。方法采用PCR方法扩增N1ICD基因,构建慢病毒重组质粒p HBLV-N1ICD-Zs Green-Puro（LV-N1ICD）,采用PCR和基因测序鉴定

【作者】

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邹斌吴霞周学亮詹宇亮赖松青刘季春

【机构】

：

南昌大学第一附属医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2017年6期

【关键词】

：

肺腺癌 Notch蛋白胞内结构域慢病毒重组质粒 lung adenocarcinoma Notch protein intracellular doma

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（81570262）, 江西省研究生创新专项资金（YC2015-B009）

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目的构建Notch1胞内结构域（N1ICD）稳定表达的肺腺癌A549细胞株。方法采用PCR方法扩增N1ICD基因,构建慢病毒重组质粒p HBLV-N1ICD-Zs Green-Puro（LV-N1ICD）,采用PCR和基因测序鉴定重组质粒。高纯度无内毒素抽提慢病毒重组质粒和辅助包装原件载体质粒,使用慢病毒空载质粒（LV-Zs Green-Puro）和LVN1ICD共转染293T细胞包装慢病毒,利用药物筛选法测定病毒滴度。将A549细胞分成A549-N1ICD组和A549-Zs Green-Puro组,分别

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