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以腐蹄病A型节瘤拟杆菌染色体DNA为模板,根据设计的上、下游引物进行PCR反应,扩增出了大小约0.78kb的基因片段,用T4DNA连接酶将PCR产物与pGEM-T-Easy载体连接,构建了重组质粒.并以EcoRV和SalI双酶切重组质粒鉴定目的基因的插入方向.经序列测定,克隆的目的基因片段为Pili基因.