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利用PCR技术，从C型产气荚膜梭菌染色体DNA中扩增出β1毒素基因，然后用限制性核酸内切酶BamHI和EcoRI对其进行双酶切处理，回收0．95kb的β1毒素基因片段，最后将其定向克隆在事先经同样内切酶处理的载体pET-28c中相应位点上，转化至受体菌B121(DE3)qh。经BamHI和Eco RI双酶切鉴定和核苷酸序列测定证实，构建的重组质粒pETXBl含有B毒素基因，并且具有正确的基因序列和阅读框架。重组菌株BI21(DE3)(pETXB1)经IPIG诱导后，其表达产物经ELISA检测和SDS-PA