目的 建立连接酶链反应-酶联免疫吸附试验(LCR-ELISA)检测沙眼衣原体DNA的方法,并初步应用于检测新生儿沙眼衣原体感染.方法针对沙眼衣原体外膜蛋白基因设计4条引物,并分别在其两端标记地高辛和生物素.用此4条引物进行LCR扩增沙眼衣原体DNA.带有生物素和地高辛双标记的扩增产物以ELISA方法显色判断结果.采集328份肺炎新生儿鼻咽标本,分别对其进行培养和LCR扩增,应用ELISA检测有无沙眼衣原体感染.结果LCR-ELISA方法可以检测出6种沙眼衣原体标准株,而对2种肺炎衣原体和其他细菌DNA无反应,显示出较强的特异性;可检测出10fg的DNA,较传统电泳法敏感10倍,且避免了溴化乙啶的污染.328份标本中,LCR-ELISA检测出68份阳性,培养仅检测出60份,两者相比差异有显著性.以扩大的金标准判断,LCR-ELISA的特异性、敏感性分别为100%和98.6%;而培养的特异性、敏感性分别为100%和、86.9%.结论LCR-ELISA是一种特异而敏感的基因扩增方法,避免了溴化乙啶污染,判断结果客观,检测方便.经临床初步应用,取得良好结果,值得进一步研究和完善。