【摘 要】
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【目的】从水稻种子中分离出优势内生菌,研究其对小球藻生长、生化组分及油脂积累的影响,探索植物内生菌作为促进微藻生长和生化品质改良的新微生物资源的可行性.【方法】以粳稻品种日本晴种子为试验材料,采用传统表面消毒法分离获得内生菌.以蛋白核小球藻为研究对象,以纯藻为对照,采用共培养法评估内生菌对小球藻生长及生化指标的影响.小球藻细胞中叶绿素a 和类胡萝卜素的提取采用甲醇浸提法,定量测定采用紫外分光光度法
【机 构】
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浙江工商大学食品与生物工程学院,杭州,310018
【出 处】
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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议
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【目的】从水稻种子中分离出优势内生菌,研究其对小球藻生长、生化组分及油脂积累的影响,探索植物内生菌作为促进微藻生长和生化品质改良的新微生物资源的可行性.【方法】以粳稻品种日本晴种子为试验材料,采用传统表面消毒法分离获得内生菌.以蛋白核小球藻为研究对象,以纯藻为对照,采用共培养法评估内生菌对小球藻生长及生化指标的影响.小球藻细胞中叶绿素a 和类胡萝卜素的提取采用甲醇浸提法,定量测定采用紫外分光光度法.小球藻油脂提取采用氯仿甲醇浸提法,脂肪酸组分分析采用气相色谱-质谱联用法.【结果】分离获得一株在水稻种子中常见且数量较多的内生细菌REY-1,为革兰氏阴性短杆状,经16SrDNA 鉴定属于泛菌属Pantoea sp..REY-1 与蛋白核小球藻共培养14 d 后,菌藻共培养组中藻细胞浓度达到1.15×108 cells/mL,是对照组的1.97 倍.14 d培养结束时,菌藻共培养组的菌藻比反转为1﹕100,说明REY-1 促进蛋白核小球藻的生长,其自身增殖又受到藻细胞的抑制,二者存在显著的互作效应.菌藻共培养组藻细胞叶绿素a 和类胡萝卜素总浓度与对照差异不显著,藻细胞油脂含量比对照组增加78.00％,油脂产率(2.14 mg·L-1·d-1)比对照组增加了1.68倍.2种培养体系中藻细胞脂肪酸主要组分相似,均为棕榈酸(16﹕0)、亚油酸(18﹕2)和亚麻酸(18﹕3).REY-1 共培养处理使藻细胞的单不饱和脂肪酸相对含量比对照增加了32.37％,短链脂肪酸肉豆蔻酸(14﹕0)相对含量比对照增加了2.12 倍,差异显著.此外共培养组藻细胞新合成一种长链脂肪酸—芥酸(22﹕1),相对含量达到藻细胞总脂肪酸的1.68％.【结论】水稻种子内生泛菌REY-1能在BG11 培养液中长期存活并与蛋白核小球藻产生互作,显著提高小球藻生物量和油脂含量,大幅提高小球藻油脂产率并影响脂肪酸相对组成比例的生物学效应.水稻种子内生菌可以作为开发小球藻共生菌的优良微生物新资源.
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