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采用硫酸铵沉淀和柱层析（DEAE-Sepharose F．F．，Sephacryl S-200，TSK-DEAE）初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）HPI可溶性氢酶，研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响．研究表明，可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃，催化放氢的最适pH值为7.5，甲基紫晶（MV）是氢酶催化放氢的最适人工电子载体，氧对氢酶催化活性有较大的抑制作用．