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[目的]研究超声波-反复冻融协同作用对黑木耳菌丝体破壁的影响，并确定最佳破壁组合条件。[方法]利用单因素试验，研究了超声波处理过程中破壁时间、加水量、破壁次数、冷冻时间、冻融次数对多糖得率的影响，并利用正交试验设计确定最佳条件组合。[结果]单因素试验结果表明，破壁时间以20 min为宜，选择15倍为最适加水量，选择2次超声波破壁次数较宜，冷冻时间以30 min为宜，选择3次冻融次数较为合适。正交试验结果表明，各因素的影响效果依次为破壁时间、破壁次数和冻结时间，最佳组合条件为冷冻时间30 min，破壁时间2