【摘 要】
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目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型。方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖
【机 构】
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广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科,军事医学研究院生物工程研究所,空军军医大学基础医学院,广西肝癌诊疗工程技术研究中心,区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(82070595,81773205),国家自然科学基金地区基金(81860502),区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室(GKE2019-06,GKE-ZZ202004)
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目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型。方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞的葡萄糖产出水平、糖代谢关键酶基因表达水平,以及cAMP-PKA信号通路的激活情况,建立小鼠原代肝细胞糖异生研究模型。结果:分离的小鼠原代肝细胞具有典型的肝细胞形态,可见双核,细胞相互接触,排列成肝索样结构。在胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞糖异生葡萄糖产出量显著增加,小鼠原代肝细胞糖异生关键酶基因表达明显上调,且胰高血
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