右美托咪啶预处理对脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响及其可能机制

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目的:探讨右美托咪啶预处理对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的影响及其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC-12),采用随机数字表法分为4组(n=24):正常对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+右美托咪定组(H/R+D组)。D组和H/R+D组加入50μmol/L的右美托咪定孵育2 h,随后C组和D组细胞置于常氧恒温细胞培养箱12 h,H/R组和H/R+D组细胞缺氧6 h复氧6 h。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色( MTT)法检测各组细胞活力,流式细胞仪检测凋亡率,逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)检测CHOP mRNA的表达,蛋白质印迹法( Western blotting )检测细胞内蛋白CHOP、cleaved caspase-3的表达量。结果与C组相比,H/R组和H/R+D组细胞活力明显下降,细胞凋亡率、CHOP mRNA 以及CHOP蛋白和cleaved caspase-3表达升高(P<0.05);D组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与H/R组相比, H/R+D组细胞活力升高,细胞凋亡率、CHOP mRNA 以及CHOP蛋白和cleaved caspase-3表达降低(P<0.05)。结论右美托咪啶预处理可以抑制缺氧复氧引起的脐静脉内皮细胞凋亡,其机制可能与下调CHOP表达有关。
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