论文部分内容阅读
目的 利用模式生物斑马鱼研究香青兰总黄酮（TFDM）整体发育急性毒性。方法 采用发育至48 h的斑马鱼暴露于5、10、20、40、42、44、46、48、50、100μg·mL-1的TFDM，分别于暴露后24、48 h（24、48 hpe），计算死亡率、半数死亡浓度(LC50)值；测量每组斑马鱼幼鱼的体长，进行形态学观察并评分；显微镜下观察斑马鱼心脏形态并拍照，记录心率，使用Image-Pro Plus 5.1测量斑马鱼静脉窦-动脉球（SV-BA）距离；显微镜下观察各组斑马鱼是否有体侧水肿来判断TFDM对肾脏的影响并拍照；应用肝脏标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg（L-FABP∶EGFP），通过检测肝脏荧光强度和面积，观察TFDM对肝脏毒性的影响。结果 TFDM的24 hpe LC50为50μg·mL-1,48 hpe LC50为48μg·mL-1,100μg·mL-1 TFDM组斑马鱼幼鱼全部死亡。与空白对照组比较，20μg·mL-1以下的TFDM对斑马鱼的形态和心、肝、肾各脏器无影响；20μg·mL-1浓度的TFDM处理斑马鱼48 h导致个别斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失，对其他脏器无显著影响；40μg·mL-1的TFDM导致斑马鱼出现轻微的心包水肿，处理48 h以后斑马鱼体长显著减小（P＜0.01），形态评分显著下降（P＜0.01），斑马鱼的肝脏形态出现轻微变化，但肝脏荧光强度和肝脏荧光面积无显著性变化，对肾脏无影响；暴露在50μg·mL-1的TFDM中24 h，斑马鱼出现心包水肿，心率显著下降（P＜0.05），肝脏荧光强度和面积显著减小（P＜0.05），肾脏无明显变化。结论 TFDM对斑马鱼的毒性较小，低浓度(≤10μg·mL-1)的TFDM对斑马鱼无毒性；中浓度(20μg·mL-1)下TFDM对斑马鱼的毒性微弱，仅导致部分斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失，对其他各脏器无毒性；高浓度(≥40μg·mL-1及以上)下有轻微的心脏毒性和肝脏毒性，在临床应用中有必要合理控制用量。